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化学发光及其所需的抗体抗原---抗原

化学发光是免疫诊断当中,目前在临床上应用最为广泛,技术最为先进的技术手段之一。化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA)是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合,用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。化学发光包含免疫反应(抗原抗体特异性结合)和发光反应两个反应部分,发光反应是化学发光物质经催化剂的催化或氧化剂的氧化等反应过程释放光信号,出现发光现象的过程。

 

抗原抗体是化学发光试剂最为核心重要的原料,其质量好坏直接影响试剂的质量。在进行化学发光试剂研发,如何选择抗原抗体,其质量评价指标有哪些,本文带你了解抗原的那些事儿。
 
 

抗原

抗原:在免疫学的定义中,指的是能诱导免疫系统发生免疫应答,并能与其产生的抗体或效应细胞在体内或体外发生特异性反应的物质。抗原诊断原料可以用于制备校准品、质控品、标准品,还可以作为免疫原制备抗体。

 

抗原分类:根据抗原的反应原性和免疫原性,可以将抗原分为完全抗原和半抗原。
 
 
抗原诊断原料根据其来源,可以分为三类:天然抗原,重组抗原,合成多肽抗原。
 

化学发光中的抗原

抗原的性能评估指标没有统一的标准,一般以活性,纯度,批间差,稳定性等作为抗原诊断原料的评估指标。

 

抗原活性

抗原活性的检测需要和天然抗原进行比对。通常,重组抗原的基因序列、氨基酸组成、分子量大小与天然抗原是一样的。抗原的决定簇可能是由一级结构决定的线性连续的,也可能是由三级结构决定的不连续的空间构象。线性表位即使蛋白变性,也具有免疫原性;而构象表位只有在空间结构完整的情况下才具有免疫原性。因此,抗原诊断原料的生物活性与表位信息有关,如果是线性表位,则与活性没有很大关系;如果是构象表位,则需要抗原蛋白的正确折叠,保证其活性,才能与相应抗体特异性结合,避免产生假阳性。

 

纯度

抗原的纯度最好大于95%。抗原与抗体一样,也会需要标记,当其纯度不够时,可能会影响标记效率,从而影响特异性、反映信号、背景值等。同时,抗原纯度不够,其免疫效率也会降低,影响抗体的制备。

 

批间差

是指每批次产品的可重复性。重复性则是保证体外诊断试剂降低批间差异并且稳定生产的前提条件。重复性和生产工艺密切挂钩,因此也是体现抗原诊断原料质量的关键指标。

 

稳定性

稳定性作为体外诊断试剂保持产品安全有效的重要指标,对产品的生产、运输、保存和使用等环节具有重要的指导意义。抗原诊断原料并不像抗体那么稳定,需要特定的Buffer进行储存,通常Buffer包括BSA、尿素、甘油、蛋白保护剂等。
 
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