PNGase F(N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F)

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COA

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产品信息

 

产品名称

产品编号

规格

价格(元)

PNGase F (N-糖酰胺酶F或肽N-糖苷酶 F

20411ES01

15000 U

763.00

20411ES02

75000 U

3373.00

 

产品描述

 

N-糖苷酶 F (PNGase F)是一种酰胺水解酶,经过和平空间站伊丽莎菌克隆主要由脑膜炎脓杆菌等革兰氏阴性菌分泌。并在 E. coli大肠杆菌中重组表达,可以裂解由天冬酰胺连接的高甘露糖、杂合和复杂的寡糖糖蛋白。PNGase F的切割位点为糖蛋白内侧N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)和天冬酰氨残基之间的酰胺键,同时将酶解后蛋白上的天冬氨酰转化为天冬氨酸。本产品常应用于抗体及其相关蛋白完全去糖基化。

 

产品性质

 

中文别名Chinese synonym

N-糖酰胺酶FN-糖苷酶 F

英文别名(English synonym

PNGase F

来源(Source

大肠杆菌表达

分子量(Molecular weight

48.4 kDa

比活性(Specific activity

50000 U/mL

缓冲液组分(Buffer

20 mM Tris-HCl pH 7.5, 50 mM NaCl, 5 mM EDTA,50%Glycerol

酶活定义(Unit Definition

1个酶活力单位指在10 μL的反应体系中,37℃条件下1小时从10 μg变性RNase B中除去超过95%的碳水化合物所需要的酶量。

 

产品组分

 

编号

组分名称

组分成分

产品货号/规格

20411ES01

20411ES02

20411-A

PNGase F

PNGase F

15000 U

75000 U

20411-B1

Buffer 110×

5% SDS; 400 mM DTT

150 μL

750 μL

20411-B2

Buffer 210×

200 mM Tris, PH 7.5

300 μL

1500 μL

20411-B3

10% NP-40

10% NP-40 in MilliQ-H2O

300 μL

1500 μL

 

运输和保存方法

 

干冰运输-20保存有效期12个月

 

使用方法

 

1、变性条件下蛋白质去糖基化:

1)在水中加入1 μL Buffer 1目标糖蛋白(1-20 μg),至终体积10 μL

2100℃温度下煮沸10 min使其变性,冰上冷却离心10

3)加入2 μLBuffer 22 μL10NP-406 μL去离子水,总反应体积20μL

4)加入2 μLPNGase轻轻混匀。37℃孵育1-3 h

2、非变性条件下蛋白质去糖基化:

1)在水中加入2 μLBuffer 2目标糖蛋白(1-20 μg至最终体积为 20 μL

2)加入 2~5 μL  PNGase F, 轻轻混匀。

337°C 孵育 4-24 h

注意:在变性条件下大多数底物能够更好的去糖基化,在非变性条件下可能需要增加PNGase F量和延长孵育时间。

 

注意事项

 

1为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

2本产品仅作科研用途!

HB221031

 

400-6111-883

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